Semax Rehberi: Nootropik Nöropeptidin Etkisi, Dozajı ve Araştırmaları
Dr. Sieglinde Klaus
Bilimsel Redaksiyon · Bergdorf Bioscience
Dr. Sieglinde Klaus
Bilimsel Redaksiyon · Bergdorf Bioscience
Dr. Sieglinde Klaus
Bilimsel Redaksiyon · Bergdorf Bioscience
Semax (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), nörobilim araştırmalarında nootropik, nöroprotektif ve nörotrofik özellikleri sayesinde giderek daha fazla önem kazanan, sentetik bir heptapeptit ve adrenokortikotropik hormon ACTH(4-10) analogudur. Moskova Moleküler Genetik Enstitüsü'nde geliştirilen peptit, melanokortin reseptörlerini (MC3/MC4) aktive eder ve tam ACTH molekülünün hormonal etkilerini göstermeksizin BDNF, NGF ve TrkB ekspresyonunu yukarı düzenler.
Semax, 1980'lerde Rusya Bilimler Akademisi Moleküler Genetik Enstitüsü'nde ACTH(4-10)'un terapötik bir analogu olarak sentezlendi. Myasoedov'un araştırma grubu, doğal ACTH fragmanının bilişsel etkilerini korurken istenmeyen hormonal etkileri ortadan kaldırmayı amaçladı. Sonuç, C-terminal Pro-Gly-Pro kuyruğu sayesinde enzimatik stabilitesi doğal ACTH(4-7) fragmanına kıyasla belirgin şekilde artan, Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro amino asit dizisine sahip bir heptapeptit oldu Myasoedov et al., 1997. Peptit zinciri yaklaşık 813 Da moleküler ağırlığa sahiptir ve suda serbestçe çözünen, beyazdan krem rengine kadar değişen liyofilize bir toz halinde bulunur. ACTH'nin kendisinin aksine Semax, ne kortizol üretimini ne de diğer adrenal steroidleri etkiler; biyolojik aktivitesi nörotrofin modülasyonu ile dopaminerjik ve serotonerjik sisteme etki gibi merkezi mekanizmalarla sınırlıdır. Bu özellik, Semax'ı biliş, nöroproteksiyon ve sinaptik plastisite üzerine temel araştırmalar için ilginç bir araç haline getirir.
Semax'ın etkisi paralel olarak işleyen birkaç moleküler mekanizmaya dayanır. Birincisi, peptit bazal ön beyindeki reseptörlere 2,4 ± 1,0 nM'lik bir ayrışma sabitiyle spesifik olarak bağlanır; bu bağlanma zamana bağlı, kalsiyuma bağlı ve tersinirdir Dolotov et al., 2006. İkincisi, Semax hipokampus, korteks ve hipotalamusta eksprese edilen ve öğrenme süreçlerinin, motivasyonun ve nöroproteksiyonun düzenlenmesinde rol oynayan MC3 ve MC4 alt tiplerindeki melanokortin reseptörlerini aktive eder. Üçüncüsü, peptit enkefalinazları kanıtlanmış şekilde inhibe eder; böylece endojen opioid peptitler daha yavaş parçalanır. Özellikle iyi belgelenmiş bir etki nörotransmitter sistemini ilgilendirir: sıçanlarla yapılan bir çalışmada, Semax verilmesinden iki saat sonra striatumdaki 5-hidroksiindolasetik asit (5-HIAA) doku içeriği %25 arttı ve hücre dışı 5-HIAA düzeyi bir ila dört saat içinde başlangıç değerinin %180'ine kadar yükseldi Eremin et al., 2005. Ayrıca mezolimbik sistemde dopaminerjik aktivitede artış gösterildi; her iki nörotransmitter sistemi de bilişsel süreçlerde ve ruh hali düzenlenmesinde kilit rol oynar.
Semax'ın nörotrofinlerin ekspresyonunu yükseltme yeteneği, peptidin en iyi araştırılmış özellikleri arasındadır. BDNF (Brain-Derived Neurotrophic Factor) ve NGF (Nerve Growth Factor) gibi nörotrofinler, nöronların yaşayabilirliği, sinaptik plastisite ve bellek oluşumu için kilit proteinlerdir. Sıçanlarda 50 µg/kg dozunda intranazal Semax uygulamasının ardından, 30 dakika içinde bazal ön beyindeki BDNF protein konsantrasyonunda anlamlı bir artış ölçüldü Dolotov et al., 2006. Buna paralel olarak Agapova ve arkadaşları, Semax'ın hipokampus, frontal korteks ve retinada hem BDNF hem de NGF gen ekspresyonunu zamana bağlı olarak uyardığını ve maksimum yukarı düzenlemeye hipokampusta üç saat sonra ulaşıldığını gösterdi Agapova et al., 2007. Özellikle önemli olan, BDNF'nin yüksek afiniteli reseptörü olan TrkB reseptörünün eşzamanlı aktivasyonudur; çünkü etkili bir nöroprotektif sinyal kaskadını ancak nörotrofin ve reseptörün birlikte ekspresyonu tetikler Dolotov et al., 2006. Bu sonuçlar, Semax'ın tüm nörotrofin sinyal ağını koordineli biçimde aktive ettiğini ve bunun nöroprotektif özelliklerini moleküler düzeyde açıkladığını düşündürmektedir.
Semax'ın nöroprotektif özellikleri, klinik açıdan yüksek öneme sahip bir araştırma alanı olan serebral iskemi bağlamında yoğun biçimde incelenmiştir. Orta serebral arterin kalıcı tıkanması (pMCAO) ile oluşturulan bir sıçan modelinde Semax, tıkanmadan üç saat sonra BDNF, TrkC ve TrkA'nın, 24 saat sonra ise NT-3 ve NGF'nin transkripsiyonunu güçlendirdi Shadrina et al., 2009. Birkaç nörotrofin geninin zaman içinde kademeli olarak aktive edilmesi, iskemik kaskadın farklı evrelerini ele alan koordineli bir koruma mekanizmasına işaret eder. Transkriptom düzeyinde, Filippenkov ve arkadaşlarının kapsamlı bir çalışması, Semax'ın iskemi-reperfüzyon sonrasında enflamatuar süreçlerle ilişkili genlerin ekspresyonunu baskıladığını ve aynı zamanda nörotransmisyonda görevli genleri aktive ettiğini gösterdi Filippenkov et al., 2020. Somut olarak, proinflamatuar sitokinlerde azalma ve sinaptik vezikül proteinlerine ait genlerde yukarı düzenleme gözlendi. Dikkat çekici olan, yalnızca Semax'ın kendisinin değil, ana metaboliti Pro-Gly-Pro'nun (PGP) da nöroprotektif transkripsiyon etkileri göstermesidir; bu, ana peptidin parçalanmasının ötesinde uzayan bir biyolojik etkinliğe işaret eder.
Literatürde tanımlanan dozlar, araştırma modeline ve uygulama yoluna göre önemli ölçüde değişir. Hayvan deneylerinde standart doz aralığı intranazal olarak 50 ila 600 µg/kg'dır; bilişsel ve nöroprotektif etkilere ilişkin yayımlanmış çalışmaların çoğu referans doz olarak 50 µg/kg kullanır. Nootropik potansiyele yönelik insan çalışmalarında, 10 ila 14 günlük dönemler boyunca günde bir ila üç kez intranazal 200 ila 600 µg dozlar incelenmiştir Myasoedov et al., 1997. İskemik inme gibi akut endikasyonlara yönelik klinik çalışmalarda, tedavi olaydan sonraki 6 ila 12 saat içinde başlatılmış ve 5 ila 10 gün sürdürülmüş; dozlar belirgin şekilde daha yüksek olup intranazal olarak günde iki kez 6 mg (toplam günlük doz 12 mg) uygulanmıştır. İntranazal uygulama, Semax bu yolla sıçan beynine iki dakika içinde ulaştığı için tercih edilen uygulama yoludur; gram beyin dokusu başına verilen radyoaktivitenin %0,093'ü saptanmış olup bunun %80'i sağlam Semax molekülüne aittir Glazova et al., 2006. Bergdorf Bio, Semax'ı farklı araştırma protokolleri için hassas dozlamaya olanak tanıyan 10 mg'lık flakonlar halinde sunar. Şimdi Semax sipariş edin
Semax'ın farmakokinetiği, peptidin plazma yarı ömrü yalnızca yaklaşık 2 ila 3 dakika olmasına rağmen hızlı bir etki başlangıcı ve şaşırtıcı ölçüde uzun bir etki süresiyle karakterize edilir. Bu görünürdeki çelişki, hızlı MSS geçişi ve bunun ardından devreye giren, ana molekülün varlığının çok ötesinde etki gösteren hücre içi sinyal kaskadlarının aktivasyonuyla açıklanır. İntranazal uygulamadan sonra Semax beyne iki dakika içinde ulaşır; parçalanma esas olarak peptidazlar üzerinden gerçekleşir ve tripeptit metaboliti Pro-Gly-Pro, biyolojik numunelerde ana parçalanma ürünü olarak saptanır Glazova et al., 2006. Sağlam peptidin kısa yarı ömrüne rağmen, bellek ve dikkat üzerindeki işlevsel etkiler 20 ila 24 saat sürer; bu durum, protein konsantrasyonları saatler boyunca yüksek kalan BDNF ve NGF'nin uzun süreli yukarı düzenlenmesine bağlanır. Atılım renal yoldan gerçekleşir. Araştırma pratiği açısından bu farmakokinetik, inceleme dönemi boyunca sabit nörotrofik etkileri sürdürmek için günde bir ila iki kez uygulamanın yeterli olabileceği anlamına gelir. Liyofilize tozun yüksek su çözünürlüğü, yeniden çözündürmeyi ve hassas seyreltme serilerinin hazırlanmasını kolaylaştırır.
Semax'ın uygun şekilde saklanması ve elleçlenmesi, peptit bütünlüğünün korunması ve deneysel sonuçların yeniden üretilebilirliği için belirleyicidir. Liyofilize Semax 2 ila 8 °C'de saklanmalıdır; birkaç aya varan uzun süreli depolama için –20 °C veya altındaki bir sıcaklık önerilir. Oda sıcaklığında liyofilize toz yaklaşık üç hafta stabil kalır. Ana bozunma yolları arasında N-terminal metionin kalıntısının oksidasyonu, peptit bağının (özellikle Pro-Gly bağlarında) hidrolizi ve deamidasyon yer alır. Koruyucu önlemler arasında inert gaz atmosferi (azot veya argon) altında saklama, yeniden çözündürülmüş çözeltilerde %0,1 askorbik asit gibi antioksidanların eklenmesi ve metal içermeyen tamponlar ile kapların kullanılması yer alır. Bakteriyostatik su ile yeniden çözündürme sonrasında çözelti 2 ila 8 °C'de yaklaşık 30 gün stabildir; daha uzun süreli saklama için –18 °C'de dondurulmalıdır. Peptit stabilitesini anlamlı ölçüde azalttığı için tekrarlanan dondurma-çözme döngülerinden kaçınılmalıdır. Trehaloz, mannitol veya gliserol (%1 ila 5) gibi yardımcı maddelerin eklenmesi, dondurma-çözme döngülerinde yeniden çözündürülmüş çözeltilerin stabilitesini artırabilir. Bergdorf Bio, tüm Semax flakonlarını eksiksiz parti dokümantasyonu ve ekteki Analiz Sertifikası (Certificate of Analysis, CoA) ile sunar.
Araştırma peptidinin saflığı, deneysel sonuçların geçerliliğini doğrudan etkileyen kritik bir kalite parametresidir. Semax ile yeniden üretilebilir araştırma sonuçları için en az %98 saflık önerilir; Bergdorf Bio, Semax'ı HPLC ile doğrulanmış ≥%99 saflıkta sunar. Analiz, sentetik peptitlerin saflık tayini için altın standart olan ters faz HPLC (RP-HPLC) ile yapılır. Olası safsızlıklar arasında katı faz sentezinden kaynaklanan kısaltılmış diziler, delesyon ve insersiyon varyantları ile N-terminal metioninin oksidasyon ürünleri bulunur. Bir Analiz Sertifikası (CoA), HPLC saflık değerinin yanı sıra doğru moleküler kütleyi doğrulamak için kütle spektrumunu (MS) da içermelidir. Araştırma sonuçları yorumlanırken, %1 ila 2'lik safsızlıkların bile sonucu çarpıtabilecek biyolojik olarak aktif fragmanlar içerebileceği dikkate alınmalıdır; bu durum özellikle nanomolar konsantrasyonların bile etki tetiklediği nörotrofin ekspresyonu çalışmaları için geçerlidir. Bergdorf Bio her parti için HPLC kromatogramı ve kütle spektrumu içeren eksiksiz bir dokümantasyon sağlar; bu da partiler arası karşılaştırılabilirliği sağlar. GMP'ye uygun üretim ve parti izlenebilirliği, deneysel sonuçların belirli bir üretim partisiyle kesin biçimde ilişkilendirilmesini mümkün kılar.
Semax, sıklıkla diğer nöropeptitler bağlamında, özellikle de Moskova Enstitüsü'nde geliştirilmiş bir başka peptit olan Selank ile birlikte tartışılır. Semax bir ACTH(4-10) analogu olup ağırlıklı olarak melanokortin reseptörleri ve nörotrofin modülasyonu üzerinden etki ederken, Selank esas olarak endojen opioid sistemi ve GABAerjik mekanizmalar üzerinden anksiyolitik ve immünomodülatör etkiler gösteren bir tuftsin analogudur (Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro). Her iki peptit de stabilize edici C-terminal Pro-Gly-Pro kuyruğunu paylaşır. En önemli fark birincil etki profilindedir: Semax, belirgin BDNF yukarı düzenlemesiyle daha güçlü nootropik ve nöroprotektif etkiler gösterirken, Selank ağırlıklı olarak anksiyolitik etki eder ve GABA reseptör alt birimlerinin ekspresyonunu modüle eder. Araştırma pratiğinde peptitler araştırma sorusuna göre hedefli biçimde kullanılır: Semax biliş, nöroproteksiyon ve sinaptik plastisite çalışmaları için; Selank ise anksiyete benzeri davranış ve immün düzenleme incelemeleri için. Bazı araştırma protokollerinde iki peptidin kombinasyonu incelenmiştir, ancak bu konudaki veriler sınırlıdır. Amino asit dizisi, moleküler ağırlık (Semax: yaklaşık 813 Da; Selank: yaklaşık 751 Da) ve reseptör özgüllüğü temelden farklıdır; bu nedenle araştırma protokollerinde birinin diğerinin yerine doğrudan konulması uygun olmaz.
Semax hakkındaki mevcut araştırma literatürü elverişli bir güvenlik profiline işaret etmektedir; ancak veriler ağırlıklı olarak hayvan çalışmalarından ve sınırlı sayıda insan çalışmasından gelmektedir. Klinik öncesi çalışmalarda sıçanlar, intranazal yolla verilen 600 µg/kg'a varan dozlarda anlamlı bir davranışsal anormallik ya da histopatolojik değişiklik göstermedi. Peptit, adrenal bezdeki ACTH reseptörlerine afinitesi olmadığı için ne kortizol düzeyini ne de diğer adrenal steroidleri etkiler. İnsan çalışmalarında, incelenen 200 ila 600 µg intranazal dozlarda ciddi yan etkiler bildirilmemiştir; ara sıra hafif nazal tahriş ve geçici baş ağrısı belgelenmiştir Myasoedov et al., 1997. Tekrarlanan kullanımda uzun vadeli güvenliğin henüz kapsamlı şekilde tanımlanmadığını ve mevcut insan çalışmalarının ağırlıklı olarak erişimi ve değerlendirmesi kısıtlı olabilecek Rus literatüründen geldiğini vurgulamak önemlidir. Araştırmacılar güvenlik verilerini yorumlarken, sonuçların çoğunun murin modellerde elde edildiğini ve diğer türlere doğrudan ekstrapolasyonun kendiliğinden haklı gösterilemeyeceğini dikkate almalıdır. Peptit yalnızca araştırma amaçlıdır.
Hayır. Semax yalnızca araştırma maddesi olarak satılır ve insan tüketimine yönelik değildir. Rusya'da onaylı farmasötik formülasyonlar bulunmaktadır, ancak bunların düzenleyici statüsü AB'ye veya diğer yargı alanlarına aktarılamaz.
Liyofilize Semax, flakonun iç duvarına yavaşça bakteriyostatik su (%0,9 benzil alkol) eklenerek yeniden çözündürülür. Çözelti çalkalanmamalı, hafifçe döndürülerek karıştırılmalıdır. Yeniden çözündürme sonrasında peptit 2 ila 8 °C'de yaklaşık 30 gün stabildir.
Araştırma literatüründe Semax'ı Selank veya diğer nöropeptitlerle kombinasyon halinde kullanan protokoller bulunmaktadır. Etkileşimler kapsamlı şekilde tanımlanmadığı için her kombinasyon kontrollü bir deney tasarımında doğrulanmalıdır.
Her sevkiyata HPLC saflık değeri ve kütle spektrumu içeren bir Analiz Sertifikası eklenir.
Bergdorf Bio, Semax'ı ≥%99 HPLC ile doğrulanmış saflıkta ve eksiksiz parti dokümantasyonuyla sunar. Her parti geriye doğru izlenebilir olup Analiz Sertifikası'nda HPLC kromatogramı, kütle spektrumu ve amino asit dizisine ilişkin bilgiler yer alır.
Semax (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), nörobilim araştırmalarında nootropik, nöroprotektif ve nörotrofik özellikleri sayesinde giderek daha fazla önem kazanan, sentetik bir heptapeptit ve adrenokortikotropik hormon ACTH(4-10) analogudur. Moskova Moleküler Genetik Enstitüsü'nde geliştirilen peptit, melanokortin reseptörlerini (MC3/MC4) aktive eder ve tam ACTH molekülünün hormonal etkilerini göstermeksizin BDNF, NGF ve TrkB ekspresyonunu yukarı düzenler.
Semax, 1980'lerde Rusya Bilimler Akademisi Moleküler Genetik Enstitüsü'nde ACTH(4-10)'un terapötik bir analogu olarak sentezlendi. Myasoedov'un araştırma grubu, doğal ACTH fragmanının bilişsel etkilerini korurken istenmeyen hormonal etkileri ortadan kaldırmayı amaçladı. Sonuç, C-terminal Pro-Gly-Pro kuyruğu sayesinde enzimatik stabilitesi doğal ACTH(4-7) fragmanına kıyasla belirgin şekilde artan, Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro amino asit dizisine sahip bir heptapeptit oldu Myasoedov et al., 1997. Peptit zinciri yaklaşık 813 Da moleküler ağırlığa sahiptir ve suda serbestçe çözünen, beyazdan krem rengine kadar değişen liyofilize bir toz halinde bulunur. ACTH'nin kendisinin aksine Semax, ne kortizol üretimini ne de diğer adrenal steroidleri etkiler; biyolojik aktivitesi nörotrofin modülasyonu ile dopaminerjik ve serotonerjik sisteme etki gibi merkezi mekanizmalarla sınırlıdır. Bu özellik, Semax'ı biliş, nöroproteksiyon ve sinaptik plastisite üzerine temel araştırmalar için ilginç bir araç haline getirir.
Semax'ın etkisi paralel olarak işleyen birkaç moleküler mekanizmaya dayanır. Birincisi, peptit bazal ön beyindeki reseptörlere 2,4 ± 1,0 nM'lik bir ayrışma sabitiyle spesifik olarak bağlanır; bu bağlanma zamana bağlı, kalsiyuma bağlı ve tersinirdir Dolotov et al., 2006. İkincisi, Semax hipokampus, korteks ve hipotalamusta eksprese edilen ve öğrenme süreçlerinin, motivasyonun ve nöroproteksiyonun düzenlenmesinde rol oynayan MC3 ve MC4 alt tiplerindeki melanokortin reseptörlerini aktive eder. Üçüncüsü, peptit enkefalinazları kanıtlanmış şekilde inhibe eder; böylece endojen opioid peptitler daha yavaş parçalanır. Özellikle iyi belgelenmiş bir etki nörotransmitter sistemini ilgilendirir: sıçanlarla yapılan bir çalışmada, Semax verilmesinden iki saat sonra striatumdaki 5-hidroksiindolasetik asit (5-HIAA) doku içeriği %25 arttı ve hücre dışı 5-HIAA düzeyi bir ila dört saat içinde başlangıç değerinin %180'ine kadar yükseldi Eremin et al., 2005. Ayrıca mezolimbik sistemde dopaminerjik aktivitede artış gösterildi; her iki nörotransmitter sistemi de bilişsel süreçlerde ve ruh hali düzenlenmesinde kilit rol oynar.
Semax'ın nörotrofinlerin ekspresyonunu yükseltme yeteneği, peptidin en iyi araştırılmış özellikleri arasındadır. BDNF (Brain-Derived Neurotrophic Factor) ve NGF (Nerve Growth Factor) gibi nörotrofinler, nöronların yaşayabilirliği, sinaptik plastisite ve bellek oluşumu için kilit proteinlerdir. Sıçanlarda 50 µg/kg dozunda intranazal Semax uygulamasının ardından, 30 dakika içinde bazal ön beyindeki BDNF protein konsantrasyonunda anlamlı bir artış ölçüldü Dolotov et al., 2006. Buna paralel olarak Agapova ve arkadaşları, Semax'ın hipokampus, frontal korteks ve retinada hem BDNF hem de NGF gen ekspresyonunu zamana bağlı olarak uyardığını ve maksimum yukarı düzenlemeye hipokampusta üç saat sonra ulaşıldığını gösterdi Agapova et al., 2007. Özellikle önemli olan, BDNF'nin yüksek afiniteli reseptörü olan TrkB reseptörünün eşzamanlı aktivasyonudur; çünkü etkili bir nöroprotektif sinyal kaskadını ancak nörotrofin ve reseptörün birlikte ekspresyonu tetikler Dolotov et al., 2006. Bu sonuçlar, Semax'ın tüm nörotrofin sinyal ağını koordineli biçimde aktive ettiğini ve bunun nöroprotektif özelliklerini moleküler düzeyde açıkladığını düşündürmektedir.
Semax'ın nöroprotektif özellikleri, klinik açıdan yüksek öneme sahip bir araştırma alanı olan serebral iskemi bağlamında yoğun biçimde incelenmiştir. Orta serebral arterin kalıcı tıkanması (pMCAO) ile oluşturulan bir sıçan modelinde Semax, tıkanmadan üç saat sonra BDNF, TrkC ve TrkA'nın, 24 saat sonra ise NT-3 ve NGF'nin transkripsiyonunu güçlendirdi Shadrina et al., 2009. Birkaç nörotrofin geninin zaman içinde kademeli olarak aktive edilmesi, iskemik kaskadın farklı evrelerini ele alan koordineli bir koruma mekanizmasına işaret eder. Transkriptom düzeyinde, Filippenkov ve arkadaşlarının kapsamlı bir çalışması, Semax'ın iskemi-reperfüzyon sonrasında enflamatuar süreçlerle ilişkili genlerin ekspresyonunu baskıladığını ve aynı zamanda nörotransmisyonda görevli genleri aktive ettiğini gösterdi Filippenkov et al., 2020. Somut olarak, proinflamatuar sitokinlerde azalma ve sinaptik vezikül proteinlerine ait genlerde yukarı düzenleme gözlendi. Dikkat çekici olan, yalnızca Semax'ın kendisinin değil, ana metaboliti Pro-Gly-Pro'nun (PGP) da nöroprotektif transkripsiyon etkileri göstermesidir; bu, ana peptidin parçalanmasının ötesinde uzayan bir biyolojik etkinliğe işaret eder.
Literatürde tanımlanan dozlar, araştırma modeline ve uygulama yoluna göre önemli ölçüde değişir. Hayvan deneylerinde standart doz aralığı intranazal olarak 50 ila 600 µg/kg'dır; bilişsel ve nöroprotektif etkilere ilişkin yayımlanmış çalışmaların çoğu referans doz olarak 50 µg/kg kullanır. Nootropik potansiyele yönelik insan çalışmalarında, 10 ila 14 günlük dönemler boyunca günde bir ila üç kez intranazal 200 ila 600 µg dozlar incelenmiştir Myasoedov et al., 1997. İskemik inme gibi akut endikasyonlara yönelik klinik çalışmalarda, tedavi olaydan sonraki 6 ila 12 saat içinde başlatılmış ve 5 ila 10 gün sürdürülmüş; dozlar belirgin şekilde daha yüksek olup intranazal olarak günde iki kez 6 mg (toplam günlük doz 12 mg) uygulanmıştır. İntranazal uygulama, Semax bu yolla sıçan beynine iki dakika içinde ulaştığı için tercih edilen uygulama yoludur; gram beyin dokusu başına verilen radyoaktivitenin %0,093'ü saptanmış olup bunun %80'i sağlam Semax molekülüne aittir Glazova et al., 2006. Bergdorf Bio, Semax'ı farklı araştırma protokolleri için hassas dozlamaya olanak tanıyan 10 mg'lık flakonlar halinde sunar. Şimdi Semax sipariş edin
Semax'ın farmakokinetiği, peptidin plazma yarı ömrü yalnızca yaklaşık 2 ila 3 dakika olmasına rağmen hızlı bir etki başlangıcı ve şaşırtıcı ölçüde uzun bir etki süresiyle karakterize edilir. Bu görünürdeki çelişki, hızlı MSS geçişi ve bunun ardından devreye giren, ana molekülün varlığının çok ötesinde etki gösteren hücre içi sinyal kaskadlarının aktivasyonuyla açıklanır. İntranazal uygulamadan sonra Semax beyne iki dakika içinde ulaşır; parçalanma esas olarak peptidazlar üzerinden gerçekleşir ve tripeptit metaboliti Pro-Gly-Pro, biyolojik numunelerde ana parçalanma ürünü olarak saptanır Glazova et al., 2006. Sağlam peptidin kısa yarı ömrüne rağmen, bellek ve dikkat üzerindeki işlevsel etkiler 20 ila 24 saat sürer; bu durum, protein konsantrasyonları saatler boyunca yüksek kalan BDNF ve NGF'nin uzun süreli yukarı düzenlenmesine bağlanır. Atılım renal yoldan gerçekleşir. Araştırma pratiği açısından bu farmakokinetik, inceleme dönemi boyunca sabit nörotrofik etkileri sürdürmek için günde bir ila iki kez uygulamanın yeterli olabileceği anlamına gelir. Liyofilize tozun yüksek su çözünürlüğü, yeniden çözündürmeyi ve hassas seyreltme serilerinin hazırlanmasını kolaylaştırır.
Semax'ın uygun şekilde saklanması ve elleçlenmesi, peptit bütünlüğünün korunması ve deneysel sonuçların yeniden üretilebilirliği için belirleyicidir. Liyofilize Semax 2 ila 8 °C'de saklanmalıdır; birkaç aya varan uzun süreli depolama için –20 °C veya altındaki bir sıcaklık önerilir. Oda sıcaklığında liyofilize toz yaklaşık üç hafta stabil kalır. Ana bozunma yolları arasında N-terminal metionin kalıntısının oksidasyonu, peptit bağının (özellikle Pro-Gly bağlarında) hidrolizi ve deamidasyon yer alır. Koruyucu önlemler arasında inert gaz atmosferi (azot veya argon) altında saklama, yeniden çözündürülmüş çözeltilerde %0,1 askorbik asit gibi antioksidanların eklenmesi ve metal içermeyen tamponlar ile kapların kullanılması yer alır. Bakteriyostatik su ile yeniden çözündürme sonrasında çözelti 2 ila 8 °C'de yaklaşık 30 gün stabildir; daha uzun süreli saklama için –18 °C'de dondurulmalıdır. Peptit stabilitesini anlamlı ölçüde azalttığı için tekrarlanan dondurma-çözme döngülerinden kaçınılmalıdır. Trehaloz, mannitol veya gliserol (%1 ila 5) gibi yardımcı maddelerin eklenmesi, dondurma-çözme döngülerinde yeniden çözündürülmüş çözeltilerin stabilitesini artırabilir. Bergdorf Bio, tüm Semax flakonlarını eksiksiz parti dokümantasyonu ve ekteki Analiz Sertifikası (Certificate of Analysis, CoA) ile sunar.
Araştırma peptidinin saflığı, deneysel sonuçların geçerliliğini doğrudan etkileyen kritik bir kalite parametresidir. Semax ile yeniden üretilebilir araştırma sonuçları için en az %98 saflık önerilir; Bergdorf Bio, Semax'ı HPLC ile doğrulanmış ≥%99 saflıkta sunar. Analiz, sentetik peptitlerin saflık tayini için altın standart olan ters faz HPLC (RP-HPLC) ile yapılır. Olası safsızlıklar arasında katı faz sentezinden kaynaklanan kısaltılmış diziler, delesyon ve insersiyon varyantları ile N-terminal metioninin oksidasyon ürünleri bulunur. Bir Analiz Sertifikası (CoA), HPLC saflık değerinin yanı sıra doğru moleküler kütleyi doğrulamak için kütle spektrumunu (MS) da içermelidir. Araştırma sonuçları yorumlanırken, %1 ila 2'lik safsızlıkların bile sonucu çarpıtabilecek biyolojik olarak aktif fragmanlar içerebileceği dikkate alınmalıdır; bu durum özellikle nanomolar konsantrasyonların bile etki tetiklediği nörotrofin ekspresyonu çalışmaları için geçerlidir. Bergdorf Bio her parti için HPLC kromatogramı ve kütle spektrumu içeren eksiksiz bir dokümantasyon sağlar; bu da partiler arası karşılaştırılabilirliği sağlar. GMP'ye uygun üretim ve parti izlenebilirliği, deneysel sonuçların belirli bir üretim partisiyle kesin biçimde ilişkilendirilmesini mümkün kılar.
Semax, sıklıkla diğer nöropeptitler bağlamında, özellikle de Moskova Enstitüsü'nde geliştirilmiş bir başka peptit olan Selank ile birlikte tartışılır. Semax bir ACTH(4-10) analogu olup ağırlıklı olarak melanokortin reseptörleri ve nörotrofin modülasyonu üzerinden etki ederken, Selank esas olarak endojen opioid sistemi ve GABAerjik mekanizmalar üzerinden anksiyolitik ve immünomodülatör etkiler gösteren bir tuftsin analogudur (Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro). Her iki peptit de stabilize edici C-terminal Pro-Gly-Pro kuyruğunu paylaşır. En önemli fark birincil etki profilindedir: Semax, belirgin BDNF yukarı düzenlemesiyle daha güçlü nootropik ve nöroprotektif etkiler gösterirken, Selank ağırlıklı olarak anksiyolitik etki eder ve GABA reseptör alt birimlerinin ekspresyonunu modüle eder. Araştırma pratiğinde peptitler araştırma sorusuna göre hedefli biçimde kullanılır: Semax biliş, nöroproteksiyon ve sinaptik plastisite çalışmaları için; Selank ise anksiyete benzeri davranış ve immün düzenleme incelemeleri için. Bazı araştırma protokollerinde iki peptidin kombinasyonu incelenmiştir, ancak bu konudaki veriler sınırlıdır. Amino asit dizisi, moleküler ağırlık (Semax: yaklaşık 813 Da; Selank: yaklaşık 751 Da) ve reseptör özgüllüğü temelden farklıdır; bu nedenle araştırma protokollerinde birinin diğerinin yerine doğrudan konulması uygun olmaz.
Semax hakkındaki mevcut araştırma literatürü elverişli bir güvenlik profiline işaret etmektedir; ancak veriler ağırlıklı olarak hayvan çalışmalarından ve sınırlı sayıda insan çalışmasından gelmektedir. Klinik öncesi çalışmalarda sıçanlar, intranazal yolla verilen 600 µg/kg'a varan dozlarda anlamlı bir davranışsal anormallik ya da histopatolojik değişiklik göstermedi. Peptit, adrenal bezdeki ACTH reseptörlerine afinitesi olmadığı için ne kortizol düzeyini ne de diğer adrenal steroidleri etkiler. İnsan çalışmalarında, incelenen 200 ila 600 µg intranazal dozlarda ciddi yan etkiler bildirilmemiştir; ara sıra hafif nazal tahriş ve geçici baş ağrısı belgelenmiştir Myasoedov et al., 1997. Tekrarlanan kullanımda uzun vadeli güvenliğin henüz kapsamlı şekilde tanımlanmadığını ve mevcut insan çalışmalarının ağırlıklı olarak erişimi ve değerlendirmesi kısıtlı olabilecek Rus literatüründen geldiğini vurgulamak önemlidir. Araştırmacılar güvenlik verilerini yorumlarken, sonuçların çoğunun murin modellerde elde edildiğini ve diğer türlere doğrudan ekstrapolasyonun kendiliğinden haklı gösterilemeyeceğini dikkate almalıdır. Peptit yalnızca araştırma amaçlıdır.
Hayır. Semax yalnızca araştırma maddesi olarak satılır ve insan tüketimine yönelik değildir. Rusya'da onaylı farmasötik formülasyonlar bulunmaktadır, ancak bunların düzenleyici statüsü AB'ye veya diğer yargı alanlarına aktarılamaz.
Liyofilize Semax, flakonun iç duvarına yavaşça bakteriyostatik su (%0,9 benzil alkol) eklenerek yeniden çözündürülür. Çözelti çalkalanmamalı, hafifçe döndürülerek karıştırılmalıdır. Yeniden çözündürme sonrasında peptit 2 ila 8 °C'de yaklaşık 30 gün stabildir.
Araştırma literatüründe Semax'ı Selank veya diğer nöropeptitlerle kombinasyon halinde kullanan protokoller bulunmaktadır. Etkileşimler kapsamlı şekilde tanımlanmadığı için her kombinasyon kontrollü bir deney tasarımında doğrulanmalıdır.
Her sevkiyata HPLC saflık değeri ve kütle spektrumu içeren bir Analiz Sertifikası eklenir.
Bergdorf Bio, Semax'ı ≥%99 HPLC ile doğrulanmış saflıkta ve eksiksiz parti dokümantasyonuyla sunar. Her parti geriye doğru izlenebilir olup Analiz Sertifikası'nda HPLC kromatogramı, kütle spektrumu ve amino asit dizisine ilişkin bilgiler yer alır.